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基因編輯能給養豬業帶來什么?

日期:2024/12/7 16:12:05


01/什么是基因編輯?

基因編輯允許對生物體的基因組進行精確的改變。這包括通過精確地從DNA序列中添加、改變或去除核苷酸來進行修改。在現有的技術中,CRISPR-Cas9技術因其高效、準確、使用相對簡單而受到廣泛歡迎。

02/CRISPR-Cas9是如何工作的?

使用向導RNA,這是一個由20個核苷酸組成的小序列,與要修飾的DNA部分相匹配。
該指南將Cas9酶引導到兩條DNA鏈應該被切割的確切位置(圖1)。
在分裂后,生物體試圖通過一種稱為非同源末端連接(NHEJ)的過程來修復DNA。在這個修復過程中,一些堿基對可能在切割位點增加或丟失。
DNA的這些變化可以改變基因的閱讀框,導致基因產生的蛋白質的氨基酸序列發生變化。結果,蛋白質可能會有缺陷或失去功能(圖2)。


圖1. 利用CRISPR-Cas9系統進行基因編輯。引導RNA (sgRNA)識別一個特定的基因組區域,其目標是DNA內切酶Cas9,這種酶在精確的位置切割兩條DNA鏈。

圖2. 一個核苷酸插入的例子,涉及到閱讀框的改變,導致與正常情況不同的氨基酸形成,最后一個終止密碼子阻止了該蛋白質更多氨基酸的形成。

03/基因敲除動物:當DNA的變化使蛋白質失效時

當某一特定基因的基因改變使某一蛋白質的功能失效時,該動物被認為是基因敲除(KO)。這些變化類似于可以通過自發過程自然發生的突變,但在這種情況下,它們是以受控和指導的方式進行的。因此,不可能區分動物體內的突變是自然發生的還是實驗室誘導的。
基因敲除動物的一個例子是抗PRRS病毒的動物。為了使PRRSV感染豬,它需要與豬肺泡巨噬細胞中的特定受體結合。該受體由CD163基因的SRCR5結構域編碼。如果這種受體通過基因編輯被修改或刪除,病毒就不能再與細胞結合,從而防止感染,并使豬完全抵抗PRRSV。這種基因抗性可以遺傳給后代,確保后代對PRRS具有抗性。

04/敲入動物:引入新的DNA鏈和新的基因

基因編輯的另一種選擇是利用DNA被Cas9切割時引入新的DNA鏈。這樣,細胞就可以通過一種稱為同源定向修復(HDR)的過程來整合這種新的遺傳物質(圖1)。這允許有缺陷的DNA序列被功能性的DNA序列所取代,糾正基因使其再次發揮功能,或改變閱讀框以創建一個基因已失活的基因敲除動物。此外,這項技術還可以將以前沒有的新基因插入到生物體的基因組中,稱為敲入(KI)或轉基因。

轉基因豬的一個例子是那些被插入UPC1基因的豬,這種基因在這個物種中并不天然存在。這種基因使它們能夠更好地調節體溫,從而使它們更好地適應低溫。因此,豬積累較少的皮下脂肪來維持體溫,這增加了瘦肉組織的百分比(圖3)。

圖3. 對6個月大的豬在低溫暴露0、2和4小時時拍攝紅外圖像。20公斤仔豬背膘厚度

05/堿基編輯器:基因編輯的精確工具

基因編輯中最近的一種替代方法是使用堿基編輯器,這是一種特殊的酶,它不是切割DNA,而是在基因組的特定位置精確地交換堿基對。這個過程使得在不造成斷裂的情況下對DNA進行有針對性的改變成為可能。
這種類型的替代可以產生幾種效果。在某些情況下,這種變化引入了一個終止密碼子,它會過早地停止蛋白質的產生,使其不完整,甚至可能失去功能。在其他情況下,這種變化會改變蛋白質中的氨基酸(稱為錯義突變),從而改變其結構并影響其功能。在這兩種情況下,這些改變都會損害蛋白質的功能。

圖4. 使用堿基編輯器在基因組中產生點突變

所有基因編輯過的豬都一樣嗎?規范性法規vs.技術發展

對不同類型的基因編輯有技術上的了解是很重要的,因為適用或應該適用的法規在每種情況下都是不同的。目前,世界上大多數立法都嚴格限制轉基因動物的使用及其產品的商業化。然而,在區分基因編輯動物和轉基因動物方面正在取得進展,這可能導致不同的監管。從技術上講,這兩種類型的基因修飾是完全不同的。

歐盟關于基因編輯植物產品的法規,即新基因組技術(NGT),已經在審查中。這可能使這些植物免于監管轉基因生物(轉基因生物)的法律。然而,迄今為止,基因編輯動物仍然受制于轉基因生物立法,這限制了它們的發展和未來的商業化。














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